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紫外/可见分光光度计的测定方法

  • 更新时间2019-10-23
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(一)定量分析
一、法
基于朗伯-比尔定律A= εbC,当某-物质在一 一定波长下e (吸收系数,可由已知浓度样品通过测量、计算求得)为-常数,比色皿的光程也是已知,也是一个常数,只要在吸收系数的波长处测定样品溶液的吸光度值(D值),然后由下式求得该样品溶液的浓度或含量:
C=A/εb
二、标准对照法
在同样条件下,在选定的波长处,分别测定已知浓度标准溶液的吸光度值A标和样品溶液的吸光度值A样,然后由下式求得样品溶液的浓度或含量:
C样= A样+ AgxC标
三、标准曲线法(包括K因数法)
常用的定量分析方法。即在一定波长(λ ma)下测定某max物质的标准系列溶液的吸光度作校正曲线,然后测定样品溶液的吸光度值,由校正曲线求得样品溶液的浓度或含量。
所配置的标准系列溶液的吸光度应在0.1~1.bs范围内,吸收测定的精密度可达0.5%。
注意: UV/Vis的低检测浓度与吸收系数、仪器噪声、基线平直度、光谱带宽有关。而检测浓度则与吸收系数、仪器的杂散光、光谱带宽等有关,吸收系数与光谱带宽有关。
杂散光越小,检测上限越高。