分光光度计的光源在紫外光区常用氘灯或氢灯，氘灯的发射强度和使用寿命比氢灯大3-5倍，氢灯在300nm以上能量已很低，而氘灯可使用到400nm。氘灯使用波长范围为190nm-400nm。可见光区常用光源为钨灯或卤钨灯，当钨灯灯丝温度达4000K时，其发射能量大部分在可见区，但灯的寿命显著减小，为此用卤钨灯代替钨灯，其使用波长范围为350nm到2000nm。

　　氘灯有插脚式和插脚引线式两种，插脚式的氘灯发光点高度固定不变，调换新氘灯时不需要调节氘灯发光孔高度，而插脚引线式的，调换新灯时，一定要调节发光孔的高度，使用不方便。同样的，国产钨灯在换新灯时大多要调节灯丝高度，也比较麻烦。

　　氘灯和钨灯在工作时其外壳温度达数百摄氏度，手不能去触摸灯的外壳，以免烫伤，即使在不工作状态，也绝不能用手去触摸氘灯的通光孔部分和钨灯的发光面，以免沾上油污，在灯点亮后，油迹将永远烧结在灯的表面，影响灯的发光强度。

　　氘灯和钨灯的使用寿命一般达1000h以上，灯的寿命与氘灯使用的恒流电源和钨灯使用的恒压电源的设计有关。氘灯在点燃前，灯丝一定要经过预热，若氘灯的触发电压一下就直接加到阳极上，会严重影响氘灯寿命。预热时间一般从10s-30s均可。为延长氘灯寿命，可将氘灯恒流电源的工作电流调节到额定值的一半约180mA左右，可延长其寿命好几倍。氘灯电源提供的灯丝电压和灯丝电流要和氘灯的要求匹配，其值有两种：一种是2.5V，4A；另一种10V，0.8A。对钨丝灯来说，要保证电源供电电压必须符合钨灯的额定工作电压，否则会影响其使用寿命并使钨灯工作不稳定。紫外可见分光光度计钨灯的额定工作电压为12V，额定工作电流为2-3A。

　　分光光度计的稳定性和光源电源有很大关系，当氘灯电源的电流波动15，它发出的光通量就要波动6.7%；因此，决定氘灯电源稳定性的三个重要指标必须满足：电流调整率要求达到0.05%、漂移为1×10-3~5×10-4、纹波系数在0.5%以内。

　　氘灯使用寿命可采用比较法测试，按国标标准规定，如果把新的氘灯的测试数据作为100，当被测试的氘灯的能量不足新灯的45%，可认为被测试的氘灯寿命已经到期。在调换新灯前，应对新氘灯的稳定性作一次测试，测试时仪器条件为：波长250nm，光谱带宽2nm，取能量测量，时间扫描方式，纵坐标能量取50%左右，在仪器预热0.5h后，对新氘灯作一次1h漂移测试，若漂移小于0.5%/h为合格。在1h内漂移超过0.5%为不合格。