国产分光光度计采用一个可以产生多个波长的光源,通过系列分光装置,从而产生特定波长的光源,光线透过测试的样品后,部分光线被吸收,计算样品的吸光值,从而转化成样品的浓度。样品的吸光值与样品的浓度成正比。
分光光度计常用光源是钨灯,能发射出350nm-2500nm波长范围的连续光谱,适用范围是360nm-1000nm。现在常用光源是卤钨灯,其特点是发光效率大大提高,灯的使用寿命也大大延长。
紫外分光光光度计常用氢灯作为光源,其发射波长的范围为150nm-400nm。因为玻璃吸收紫外光而石英不吸收紫外光,因而氢灯灯壳用石英制成。为了使光源稳定,分光光度计均配有稳压装置。
分光光度计比色皿的使用方法:
1.拿比色皿时,手指只能捏住比色皿的毛玻璃面,不要碰比色皿的透光面,以免沾污。
2.清洗比色皿时,一般先用水冲洗,再用蒸馏水洗净。如比色皿被有机物沾污,可用盐酸-乙醇混合洗涤液(1∶2)浸泡片刻,再用水冲洗。不能用碱溶液或氧化性强的洗涤液洗比色皿,以免损坏。也不能用毛刷清洗比色皿,以免损伤它的透光面。每次做完实验时,应立即洗净比色皿。
3.比色皿外壁的水用擦镜纸或细软的吸水纸吸干,以保护透光面。
4.测定有色溶液吸光度时,一定要用有色溶液洗比色皿内壁几次,以免改变有色溶液的浓度。另外,在测定一系列溶液的吸光度时,通常都按由稀到浓的顺序测定,以减小测量误差。
5.在实际分析工作中,通常根据溶液浓度的不同,选用液槽厚度不同的比色皿,使溶液的吸光度控制在0.2-0.7。