UV紫外光度计特征性强(各种物质有其特定的红外光谱图)、能分析各种状态(气、液、固)的试样以及不破坏样品。红外光谱仪是化学、物理、地质、生物、医学、纺织、环保及材料科学等的重要研究工具和测试手段,而远红光谱更是研究金属配位化合物的重要手段。
UV紫外光度计的设计道理和事情道理,允许吸光值在一定范围内变化,即仪器有一定的准确度和度。如Eppendorf Biophotometer的准确度≤1.0%(1A)。这样多次测试的结果在均值1.0%左右之间变动,都是没事了的。另外,还需考虑核酸本身物化性质和溶解核酸的缓冲液的pH值,离子浓度等:在测试时,离子浓度过高,也会导致读数漂移,因此建议使用pH值一定、离子浓度较低的缓冲液,如TE,可大大不变读数。样品的稀释浓度同样是不成忽视的因素:因为样品中不成避免存在一些细小的颗粒,尤其是核酸样品。这些个小颗粒的存在干扰测试效果。UV紫外光度计为了zui大水平减少颗粒对测试结果的影响,要求核酸吸光值至少大于0.1A,吸光值在0.1-1.。在此范围内,颗粒的干扰相对较小,结果不变。从而意味着样品的浓度不能过低,或过高(超过光度计的测试范围)。zui后是操作因素,如混合要充分,否则吸光值过低,甚至出现负值;混合液不能存在气泡,空白液无悬浮物,否则读数漂移剧烈;必需使用相同的比色杯测试空白液和样品,否则浓度差异太大;换算系数和样品浓度单元选择一致;不能采用窗口磨损的比色杯;样品的体积必需到达比色杯要求的zui小体积等多个操作事项。
UV紫外光度计这个基团就吸收一定频率的红外线,把分子吸收的红外线的情况用仪器记录下来,便能得到全面反映试样成份特征的光谱,从而推测化合物的类型和结构。IR光谱主要是定性技术,但是随着比例记录电子装置的出现,也能迅速而准确地进行定量分析。
安装好UV紫外光度计后,检查样池位置,使其处在光路中(拉动拉手应感应到每档的定位),关好样品室门,打开仪器电源开关,预热10分钟,即可进行测量。打开样品室门,将方式定于透过率档,按0%T进行机械调零。从蒸馏水中取出比色皿,擦干。注意拿比色皿的时候拿毛玻璃面。向比色皿内注入少量试液,润洗三次,然后注入3/4至4/5的试液,用滤纸片擦干外壁所挂水珠。 将比色皿按顺序放入样品池。注意光面对光源。
UV紫外光度计是较为常用的一种数字显示光度计。 它以碘钨灯为光源,光栅为色散元件。可用波长范围是330~800nm,波长精度2nm,波长重现性为0.5nm,单色光带宽6nm,吸光度显示范围为0~1.999,UV紫外光度计吸光度的精度为0.004(A=0.5),试样架可置四个吸收池。