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紫外分光光度计的定量分析法有哪些?

发布时间:2021-04-15   点击次数:156次
   紫外分光光度计由光源、单色器、吸收池和检测器四部分组成。分析时当特定强度的入射光束(Incident beam)通过装有均匀待测物的介质时,该光束将被部分吸收,未被吸收的光将透过(Emergent)待测物溶液以及通过散射(Scattering)、反射(Reflection),包括在液面和容器表面的反射)而损失,这种损失有时可达10%,在样品测量时必须同时采用参比池和参比溶液扣除这些影响。当入射光波长一定时,待测溶液的吸光度与其浓度和液层厚度成正比(Lambert-Beer定律)。
  紫外分光光度计的定量分析方法包括以下几种:
  1.绝d法
  这是紫外分光光度计诸多分析方法中使用多的一种。这是一种以比耳定律A=εbc为基础的分析方法。某一物质在一定波长下的ε值是一个常数,石英比色皿的光程是已知的,也是一个常数。因此,可用紫外可见分光光度计在λmax波长处,测定样品溶液的吸光度值A。然后,根据比耳定律c=A/(εb),则可求得该样品溶液的含量或浓度。
  2.标准法
  在相同的测试条件下,分别测试标准样品溶液c标和被测试样品溶液(样的吸光度A标和A样)。然后,按公式求得样品溶液的浓度或含量。
  3.比吸收系数法
  由于紫外线可见分光光度计的杂散光、噪声、基线平直度和光谱带宽以及试样的前处理、玄年的化学平衡等所引起的。因此,一般情况下不采用这种方法。
  4.曲线法
  标准曲线法是常用的定量分析方法。首先,用标准物质配制一定浓度的溶液,然后,将该溶液配制成一系列的标准溶液。在一定波长下,测试每个标准溶液的吸光度,以吸光度值为纵坐标标准溶液对应的浓度值为横坐标,绘制标准曲线。后将样品溶液按标准曲线绘制程序测得吸光度值,在标准曲线上查出样品溶液对应的浓度或含量。

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