市面上的分光光度计通常有两种光路方案：单光路和双光路。
单光路方案采用一个光源和一个光路，将光信号通过样品或从样品表面反射，其光路简单，成本低，但对光源和传感器的稳定性有很高的要求，对环境也较敏感。
双光路方案有双光源双光路和单光源双光路两种，其中单光源双光路系统通过斩波器将单色仪分出的光线分位两路。双光路系统的两束光一束作为检验光，通过样品或被样品反射，另一束作为参考光，经过参比池或空气。双光路方案的优点是补偿了由于电源电压变动引起的电源强度改变，提升了检测的稳定性，降低了噪声和漂移。
分光光度计是精密仪器，正确安装、使用和保养对保持仪器良好的性能和保证测试的准确度有重要作用。
1.对仪器工作环境的要求
分光光度计应安装在稳定的工作台上，(周围不应有强磁场, 以防电磁干扰)，室内温度应保持在(10～30)℃。室内应干燥，相对湿度宜控制在<85 %，室内应无腐蚀性气体，光线不宜过强。
2.仪器保养和维护方法
(1)仪器工作电压一般为220V，允许±10 %的电压波动。为保持光源灯和检测系统的稳定性，在电源电压波动较大的实验室最好配备稳压器。
(2)为了延长光源使用寿命，在不用时不用开光源灯。如果光源灯亮度明显减弱或不稳定，应及时更换新灯。更换后要调节好灯丝位置，不要用手直接接触窗口或灯泡，避免油污沾附，若不小心接触过，要用无水乙醇擦拭。
(3)单色器是仪器的核心部分，装在密封盒内，不能拆开，为防止色散元件受潮发霉，必须经常更换干燥剂。
(4)必须正确使用吸收池，保护吸收池光学面。
(5)光电转换元件不能长时间曝光，应避免强光照射或受潮积尘。
